1、产品性能
2、反应
1)反应体系
1.纯化DNA或抑制因子少的样本,反应体系可适当减少,可减至10μl。困难模板推荐使用50μl体系;
2.直接扩增叶片种子等,需要提高MgCl2浓度;
3.部分反应50μl体系需要加入的酶量大于1U,对于非常复杂的模板,酶的用量可增大到5U/50μl。
重要提示:
(1)确保试剂使用之前完全溶解,开盖之前请稍微离心,KAPA Plant PCR Buffer是粘稠的,因此需要先在反应体系中加入水,然后再加入KAPA Plant PCR Buffer,所有试剂加入完毕之后,用枪头吹打几次混匀;
(2)KAPA Plant PCR Buffer(2 x)稀释成1 x之后,含有1.5mM MgCl2,本试剂盒单独提供MgCl2(25mM)。扩增纯化DNA,浓度1.5mM足够了,但若直接扩增植物组织,需2.05mM MgCl2;
(3)KAPA Plant PCR Enhancer(100 x),反应终浓度0.2-1.0x (1.0-0.5μL/50μL),主要用于复杂模板,无需额外提高以优化好的MgCl2和酶的浓度。
(4)以下情况需要使用试剂盒配备的稀释Buffer;①直接扩增不成功;②一个模板多次扩增,(尤其是植物组织数量有限)③储存模板样本,为了随后的PCR反应,稀释Buffer成份【pH值8.0-8.5的50mM Tris-HCI,0.1mM EDTA,0.2 x KAPA Plant PCR Enhancer】
2)反应参数
3)疑难问题与解答
3、产品信息