Scanlater Western Blot卡盒使在酶标仪上进行蛋白质免疫印迹成像检测成为可能。

产品概述

目前检测转印到 WB 膜上蛋白的技术众多包括荧光标记、银染和化学发光法等；可是每一种技术都有其局限，人们一直致力于寻找提高 WBs 定量准确度和动态检测范围的技术方法。这里介绍一种新的在 SpectraMax i3X 或 Paradigm 多功能酶标仪上检测 WBs 膜的蛋白分析方法，Scanlater Western Blot 卡盒使在酶标仪上进行蛋白质免疫印迹成像检测成为可能。膜上使用铕元素-螯合物或链霉素标记二抗特异结合被研究的蛋白。铕元素标记具有长荧光寿命周期，可至1ms 级别，所以荧光的检测采用时间分辨的模式，从而可以减少来自于自发荧光和其他短寿命周期的杂光的背景。WBs 膜被置于酶标仪内，然后使用TRF 卡盒进行 WBs 膜优化扫描，此方法不涉及酶的检测加之铕元素-螯合物标记物具有很强的光漂白抗性，因而信号十分稳定能至几周到几个月。这就允许对膜进行重复扫描以及可能进行不同条带的强度对比以及根据标品进行更精确的定量。TRF 检测方式采用单光子计数模式，所以理论的动态检测范围为>105；实际应用中，动态检测范围则受限于高含量条带的荧光饱和以及非特异性结合造成的背景因素。由于不使用CCD，所以此方法不会出现高光溢出现象，而这是化学发光和普通荧光检测的常见问题，所以能够提供非常锐利的条带和出色的图像质量。这一新颖的多功能酶标仪检测平台上的 Scanlater Western Blot 检测系统以其操作简便、检测灵敏和信号的超高稳定性，提供了出色的 WBs 检测性能表现，必将多功能酶标仪在实验室应用方面带来又一重大突破！

主要特点

1.         灵敏度：能够检测超低含量的人类细胞当中的内源性的磷酸化和泛素化的蛋白

2.         背景消除：铕元素时间分辨荧光标记，具有超长荧光寿命，至1ms级，使用TRF检测模式能降低自发荧光和其他来源的背景噪声

3.         节省时间：无需进行ECL般的耗时优化过程

4.         降低成本：不再需要成本高昂的X-射线胶片和显影剂

5.         即插即用：可随时在 SpectraMax® i3X 或 SpectraMax Paradigm 多功能酶标仪上进行高性能 WB 检测，扩展了其在实验室研究方面的应用

应用领域

Western Blot 检测、蛋白表达、丰度、修饰检测、条带灰度分析等。

实验举例

基于 Scanlter 卡盒全面探索细胞热应激反应：正常细胞长时间暴露在高温环境下会引起细胞凋亡，同样也会提高细胞 HSP70（Heat Shock Protein）的表达量。在一款微孔板检测平台 i3x 中同时进行细胞增殖的成像分析和 HSP-70 蛋白量检测等，通过多种方式检测细胞功能，如细胞热激反应。